D300s是尼康现目前DX画幅单反中的顶级产品，采用1200万像素DX画幅的CMOS传感器，支持1280×720/24fps的视频录制，连拍速度可达7张/秒，最高快门速度为1/8000s，具有约100%的视野率和0.94倍的放大率。
D300s支持CF卡和SD/SDHC卡两种存储介质，具有Live view功能，机背采用一块3英寸约92万画点（VGA）170度视角的低温多晶硅TFT LCD显示屏，它的标准感光度范围是ISO 200-3200，通过扩展可到到ISO 100-6400，具备影像感应器除尘功能。
